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雞17-酮類(lèi)固醇(17-KS)elisa試劑盒操作步驟

瀏覽次數(shù):887發(fā)布日期:2021-09-22

雞17-酮類(lèi)固醇(17-KS)elisa試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

異維 A 酸;異維甲酸(I0800000

異麥芽酮糖醇(I0465000

異麥芽糖(Y0000070

異康唑(I0 75000

異環(huán)磷酰胺(I0060000

異環(huán)磷酰胺 雜質(zhì)F(I0060012

異環(huán)磷酰胺 雜質(zhì)E(I0060010

異環(huán)磷酰胺 雜質(zhì)B(I0060004

異環(huán)磷酰胺 雜質(zhì)A(I0060002

異環(huán)磷酰胺 - 對(duì)照譜圖(I0060100

異氟醚(Y0000858

異氟醚 - 對(duì)照譜圖(Y00000 7

異丙托溴銨(I0 60000

異丙托溴銨 雜質(zhì)B(I0 61000

異丙托溴銨 雜質(zhì)A(Y0000276

乙二醇水楊酸酯(H1429400

胰腺粉(淀粉酶和脂肪酶 BRP(P0100000

胰腺粉 (蛋白酶 BRP(P0200000

依沙美肟(Y0000227

伊維菌素(I8000010

伊曲康唑(I7000000

伊拉地平(Y0000 66

伊拉地平 雜質(zhì)D(Y0000 67

一氧化氮 - 參考譜圖(N09 0000

葉綠酸0 4605

葉綠酸0 4601

葉綠素C2(需干冰運(yùn)輸0 46 A

葉綠素C (需干冰運(yùn)輸0 464A

葉綠素A(需干冰運(yùn)輸0 461A

野漆樹(shù)甙18280-025

氧托溴銨(Y0000709

氧托溴銨 雜質(zhì)D(Y000071 

氧托溴銨 雜質(zhì)B(Y0000715

氧可酮 雜質(zhì)D(Y00005 

氧氟沙星(O0120000

氧氟沙星 雜質(zhì)E(O0120050

氧氟沙星 雜質(zhì)A(O0120010

鹽酸左旋咪唑(L0 80000



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