雞17-酮類(lèi)固醇（17-KS）elisa試劑盒操作步驟

雞17-酮類(lèi)固醇(17-KS)elisa試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

異維 A 酸；異維甲酸（I0800000

異麥芽酮糖醇（I0465000

異麥芽糖（Y0000070

異康唑（I0 75000

異環(huán)磷酰胺（I0060000

異環(huán)磷酰胺 雜質(zhì)F（I0060012

異環(huán)磷酰胺 雜質(zhì)E（I0060010

異環(huán)磷酰胺 雜質(zhì)B（I0060004

異環(huán)磷酰胺 雜質(zhì)A（I0060002

異環(huán)磷酰胺 - 對(duì)照譜圖（I0060100

異氟醚（Y0000858

異氟醚 - 對(duì)照譜圖（Y00000 7

異丙托溴銨（I0 60000

異丙托溴銨 雜質(zhì)B（I0 61000

異丙托溴銨 雜質(zhì)A（Y0000276

乙二醇水楊酸酯（H1429400

胰腺粉(淀粉酶和脂肪酶 BRP（P0100000

胰腺粉 (蛋白酶 BRP（P0200000

依沙美肟（Y0000227

伊維菌素（I8000010

伊曲康唑（I7000000

伊拉地平（Y0000 66

伊拉地平 雜質(zhì)D（Y0000 67

一氧化氮 - 參考譜圖（N09 0000

葉綠酸0 4605

葉綠酸0 4601

葉綠素C2（需干冰運(yùn)輸0 46 A

葉綠素C （需干冰運(yùn)輸0 464A

葉綠素A（需干冰運(yùn)輸0 461A

野漆樹(shù)甙18280-025

氧托溴銨（Y0000709

氧托溴銨 雜質(zhì)D（Y000071 

氧托溴銨 雜質(zhì)B（Y0000715

氧可酮 雜質(zhì)D（Y00005 

氧氟沙星（O0120000

氧氟沙星 雜質(zhì)E（O0120050

氧氟沙星 雜質(zhì)A（O0120010

鹽酸左旋咪唑（L0 80000